本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測豬血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的鈉鉀 ATP 酶(Na/K ATPase)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于離子轉運、細胞膜功能及能量代謝研究等領域。
產品名稱 |
豬Na+/K+-ATP酶(Na/K ATPase)elisa試劑盒 | 英文名稱 | Na/K ATPase ELISA Kit |
貨號 | CS-0484E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:

?固相化?:微孔板預先包被抗豬 Na/K ATPase 抗體。
?結合?:加入標準品或樣本,Na/K ATPase 被固相抗體特異性捕獲。
?檢測?:加入標記的抗豬 Na/K ATPase 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
?顯色?:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
?測定?:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:

1. 樣本類型與處理
?血清?:使用無熱原/內毒素試管采集,避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清,-20℃保存,避免反復凍融。
?血漿?:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,離心后取上清。
?細胞上清?:1000×g離心10分鐘去除顆粒,-70℃保存。
?組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清,-20℃保存。
2. 注意事項
樣本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
細胞培養上清可能因細胞狀態等因素導致檢測波動,建議設復孔。
操作步驟:

1. 試劑準備
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。?
標準品梯度稀釋:取6管標準品,按說明書稀釋至0.156-10 ng/mL。
2. 實驗流程
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。?
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
關鍵提示
顯色底物避光保存,混合后應為無色。
終止液加入順序需與顯色一致,充分混勻避免綠色殘留。
使用封板膜防止蒸發,確保孵育溫度穩定。
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